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昆虫杆状病毒表达系统的经典案例分享

  重组蛋白表达系列五
  昆虫杆状病毒表达系统
  展示案例:Baculovirus / Insect Cells expression system
  昆虫细胞与哺乳动物细胞翻译和翻译后蛋白修饰的模式与能力相似,表达的重组蛋白与天然蛋白相似且具有完整的生物活性,细胞悬浮生长,容易实现大规模低成本生产;杆状病毒能容纳大分子的插入片段,易于表达异源多聚体蛋白。由于其不具有任何对哺乳动物有潜在致病性的动物病毒片段,昆虫杆状病毒表达系统问世以来,获得了人们的高度重视。
  普健生物的杆状病毒-昆虫蛋白表达服务,采用经典的Bac-to-Bac表达体系,并加以改进。在表达方式(胞内或分泌)、信号肽选择、细胞培养方式及细胞选择(Sf9、Sf21、Hi5)等方面有着丰富的案例经验,表达成功率高达99.9%,同时可提供高达200 L的蛋白表达纯化服务。
  案例展示
  Project Information
  Beta-glucosidase(后文简写为BetaGluc1)是纤维素分解酶系中的重要组成成分,能够水解结合于末端非还原性的β-D-葡萄糖键,同时释放出β-D-葡萄糖和相应的配基,参与生物糖代谢,对维持生物正常生理功能起重要作用。
  BetaGluc1采用普健杆状病毒-昆虫表达系统成功可溶表达,产量高达234.2mg/L,纯度>95%,经检验活性较高。以图为鉴Test Report
  01
  Western Blot with ECL. Detection with anti-His antibodies.   BetaGluc1 protein have expressed in sf9 cells, and they have expressed in culture medium. BetaGluc1 clone 4 was picked to generate P2 virus and do MOI test.   02
  According to the MOI test results, the best expression condition is: BetaGlu1: 150ul, Hi5, in culture medium.   03
  Purification Test   200ml scale-up and purification using High 5 cells. Purification tests results of culture medium are illustrated below.   MW. Molecular weight marker. IN.Input. FT. Flow through. W. Washes. E.Eluted fractions.   04
  Purification QC   Reducing-PAGE analysis. 2µg of sample loaded. 1.2 are BetaGlu1   05
  Fermentation and Purification   1L scale up purification test   MW. Molecular weight marker. IN. Input. FT. Flow through. W. Washes. E. Eluted fractions.   06
  Final QC   Reducing-PAGE analysis. 2µg of sample loaded. 1. 2 are BetaGlu1   昆虫杆状病毒表达主要包含这些流程及技术内容表达体系选择   多种表达载体:胞内表达和分泌表达载体系列   多种表达细胞:Sf9,Sf21,Hi-5   表达及纯化测试   高效率:优化表达方案,实验周期短;   P1代病毒生产及表达测试,P2代病毒生产及MOI测试。   大规模生产服务   可满足高达200 L的生产规模。   一站式服务   基因设计及优化、蛋白表达及纯化、后续加工处理、数据报告等。   ​

浙江有座无名皇帝墓,村民守墓千年,08年才知墓主身份文九月纪实编辑九月纪实浙江省苍南一带有一个村庄,里面的人世世代代都守护着一座千年古墓,但由于时间久远,他们早已不知道墓中的主人是谁了。直到2008年,考古专家的到来才揭开了这座古墓英国首相现身基辅庆祝乌克兰独立日当地时间8月24日,英国首相府唐宁街10号发表声明,即将卸任的英国首相鲍里斯约翰逊访问乌克兰首都基辅,参加乌克兰独立日纪念活动。约翰逊还在会见乌克兰总统泽连斯基时宣布了英国最新的对任正非未来三年把活下来作为最主要的纲领普通人该何去何从?中国手机界的扛把子都扛不住了!据华为内部人士透露,华为创始人任正非在文章中表示,2019年华为受打击时和今天的环境是不一样的,当时是精准打击华为一家公司,整个世界状况和经济并没有什阮玥被取消中国区总冠军!25岁美女秦泽文顶替,或存在潜规则内幕25岁美女空降世界小姐总决赛8月份,一份文件流出,刷新了网友的三观,让人对圈内的潜规则事件,再度产生了兴趣。据悉,这一份文件,是有世界小姐中国区组委会发出,文件声明称,将取消原来世苏联GDP比美国差许多,为什么能全球范围内与其争霸?在20世纪的后期,在世界舞台上,出现了美国与苏联争霸的局面,美国和苏联作为两个超级大国,展开了惊心动魄的争霸。在争霸的过程中,苏联一直处于守势。那么,作为超级大国,在最鼎盛时期,苏别只盯着台湾,中国真正的挑战在朝鲜半岛2022年是不平静,不平凡的一年。国际社会相继发生了俄乌战争,以及中国大陆反制美国干涉台海事务的大事儿。大部分网友都将注意力放在了台海和俄乌一边。而对于以往经常成为热点地区的朝鲜半特写丨四川等雨来21世纪经济报道记者李果成都报道小丁习惯在下午三点望向窗外。这是沪深两市收盘时间,在紧盯数块屏幕几小时后,他习惯在此时透过窗户远眺东南方的成都望江楼公园。但8月23日这一天,厚厚的诈骗300余万买彩票竟中1450万法院奖金也要追缴8月24日,据长沙广电星视频报道,近日,浙江龙游县人民法院公开审理并当庭宣判一起听障人士被诈骗案,3人因犯诈骗罪被判处10年以上有期徒刑,全额追回赃款1250余万元。2021年,一冰湖血战中国人民志愿军第27军,一支临危受命仓促赴战装备后,衣着单薄缺粮少弹的部队,远赴异国他乡,在朝鲜的崇峻岭冰天雪地中成建制歼灭了一支装备精良火力强大补怂完足战績辉煌威名远震的一个美军芬兰总理哽咽自辩我也是人,也需要寻找快乐(观察者网讯)近日,芬兰总理桑娜马林(SannaMarin)因热舞视频官邸不雅照陷入争议,她当地时间24日含泪再次回应我也是人,也需要寻找快乐。当地时间8月24日,马林在社会民主党快来聊聊正在热播的电视剧冰雨火冰雨火征文最近电视剧冰雨火正在热播,剧情紧凑,环环相扣,真是一部高质量的良心好剧。在最新的剧集当中,吴振峰的命运令人揪心,陈宇的成长叫人惊叹,林德赞杨兴权等人到底是黑是白?警局中是
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